{"id":20085,"date":"2021-06-24T09:43:45","date_gmt":"2021-06-24T12:43:45","guid":{"rendered":"https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/?p=20085"},"modified":"2022-09-23T21:51:31","modified_gmt":"2022-09-24T00:51:31","slug":"metodo-que-detecta-tres-anticorpos-sugere-novo-caminho-para-testes-comerciais-de-covid-19","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/metodo-que-detecta-tres-anticorpos-sugere-novo-caminho-para-testes-comerciais-de-covid-19\/","title":{"rendered":"M\u00e9todo que detecta tr\u00eas anticorpos sugere novo caminho para testes comerciais de covid-19"},"content":{"rendered":"<p>Um m\u00e9todo descrito por pesquisadores da Universidade Federal do Paran\u00e1 (UFPR), que detecta um anticorpo do v\u00edrus da covid-19 a mais em rela\u00e7\u00e3o aos testes-padr\u00e3o, indica uma nova abordagem para os testes sorol\u00f3gicos usados no combate \u00e0 doen\u00e7a. A inova\u00e7\u00e3o aprimora uma t\u00e9cnica tradicional de an\u00e1lise chamada citometria de fluxo, que avalia ao mesmo tempo diferentes par\u00e2metros de c\u00e9lulas ou part\u00edculas das amostras de soro sangu\u00edneo. A t\u00e9cnica foi descrita no trabalho preliminar \u201c<a href=\"https:\/\/chemrxiv.org\/articles\/preprint\/Multiplexed_Flow_Cytometric_Approach_for_Detection_of_Anti-SARS-CoV-2_IgG_IgM_and_IgA_Using_Beads_Covalently_Coupled_to_the_Nucleocapsid_Protein\/14219999\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">Multiplexed flow cytometric approach for detection of anti-sars-cov-2 IgG, IgM and IgA using beads covalently coupled to the nucleocapsid protein<\/a>\u201d, publicado em mar\u00e7o no servidor <em>ChemRxiv<\/em>.<\/p>\n<blockquote class=\"alignright\"><p>Ainda n\u00e3o h\u00e1 testes dispon\u00edveis comercialmente que detectem ao mesmo tempo os tr\u00eas tipos de anticorpos mais reagentes ao v\u00edrus da covid-19.<\/p><\/blockquote>\n<p>O m\u00e9todo criado por cientistas do Programa de P\u00f3s-Gradua\u00e7\u00e3o em Ci\u00eancias Farmac\u00eauticas e do Departamento de An\u00e1lises Cl\u00ednicas da UFPR, em colabora\u00e7\u00e3o com outros departamentos da universidade e do Hospital Erasto Gaertner, em Curitiba, faz a detec\u00e7\u00e3o simult\u00e2nea de anticorpos dos tipos IgG, IgM e IgA reagentes ao novo coronav\u00edrus. Como ant\u00edgeno (part\u00edcula ligada ao v\u00edrus que, nos testes, ajudam a identificar os anticorpos), os cientistas usaram a prote\u00edna do nucleocaps\u00eddeo, que fica no interior do Sars-CoV-2, em vez da prote\u00edna Spike, presente no &#8220;envelope&#8221;, a camada externa do v\u00edrus.<\/p>\n<p>De acordo com os autores do trabalho, n\u00e3o existem testes dispon\u00edveis comercialmente que detectem simultaneamente os tr\u00eas tipos de anticorpos. Tamb\u00e9m n\u00e3o consta nenhum teste para detec\u00e7\u00e3o de IgA na lista dos aprovados pela Food and Drug Administration (FDA), ag\u00eancia federal do Departamento de Sa\u00fade e Servi\u00e7os Humanos dos Estados Unidos.<\/p>\n<p>Os testes comerciais em geral medem apenas IgG e IgM. O cruzamento de informa\u00e7\u00f5es sobre esses anticorpos \u00e9 comum nas an\u00e1lises porque em tese eles s\u00e3o produzidos pelo organismo em momentos diferentes da infec\u00e7\u00e3o. Enquanto o IgM \u00e9 produzido primeiro, o IgG surge depois, para atacar os ant\u00edgenos (part\u00edculas invasoras) que restaram, e permanece por mais tempo no organismo (veja o infogr\u00e1fico).<\/p>\n<blockquote class=\"alignright\"><p>&#8220;A an\u00e1lise combinada de IgG, IgM e IgA melhorou o diagn\u00f3stico sorol\u00f3gico&#8221;.<\/p>\n<footer><cite>Glaucio Valdameri, professor do Programa de P\u00f3s-Gradua\u00e7\u00e3o em Ci\u00eancias Farmac\u00eauticas da UFPR<\/cite><\/footer>\n<\/blockquote>\n<p>Na pesquisa da UFPR, a inclus\u00e3o da medi\u00e7\u00e3o do IgA, um anticorpo produzido nas mucosas do corpo, permitiu que mais um dado ajudasse na melhoria do teste r\u00e1pido para o v\u00edrus da covid-19. Os resultados do estudo com essa t\u00e9cnica apontaram sensibilidade e especificidade (termos empregados na descri\u00e7\u00e3o de precis\u00e3o diagn\u00f3stica) semelhantes aos testes aprovados pela FDA.<\/p>\n<p>\u201cA detec\u00e7\u00e3o de IgA mostrou sensibilidade e especificidade aumentadas em compara\u00e7\u00e3o com um teste comercial do tipo Elisa [Enzyme Linked ImmunonoSorbent Assay, o padr\u00e3o desse tipo de teste] e a an\u00e1lise combinada de IgG, IgM e IgA melhorou o diagn\u00f3stico sorol\u00f3gico\u201d, explica o professor Glaucio Valdameri, do PPG em Ci\u00eancias Farmac\u00eauticas da UFPR.<\/p>\n<h2>Anticorpo presente em mucosas pode ser pe\u00e7a-chave<\/h2>\n<p>A sensibilidade est\u00e1 relacionada ao percentual de resultados positivos em um conjunto de pessoas com a doen\u00e7a, enquanto a especificidade est\u00e1 relacionada ao percentual de resultados negativos em um grupo de pessoas que n\u00e3o apresentam a doen\u00e7a. Na pesquisa, a sensibilidade identificada ficou entre 61% e 98% e a especificidade, entre 90% e 100%.<\/p>\n<p><a href=\"https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Teste-multiplexado.png\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" class=\"size-large wp-image-20188 alignleft\" src=\"https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Teste-multiplexado-506x1024.png\" alt=\"\" width=\"506\" height=\"1024\" srcset=\"https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Teste-multiplexado-506x1024.png 506w, https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Teste-multiplexado-148x300.png 148w, https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Teste-multiplexado-768x1553.png 768w, https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Teste-multiplexado-759x1536.png 759w, https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Teste-multiplexado.png 835w\" sizes=\"(max-width: 506px) 100vw, 506px\" \/><\/a>Os pesquisadores enfatizam a import\u00e2ncia da detec\u00e7\u00e3o simult\u00e2nea dos tr\u00eas tipos de anticorpos que, segundo a t\u00e9cnica descrita, aumenta a precis\u00e3o diagn\u00f3stica.<\/p>\n<p>\u201cEstudos recentes sugerem que a investiga\u00e7\u00e3o de um \u00fanico tipo de anticorpo pode n\u00e3o ser suficiente no caso da covid-19. A investiga\u00e7\u00e3o de IgA, em particular, parece ser de extrema import\u00e2ncia, pois poderia estratificar a doen\u00e7a\u201d, comenta a professora Vivian Rotuno Moure, do Departamento de An\u00e1lises Cl\u00ednicas da UFPR.<\/p>\n<p>A t\u00e9cnica de detec\u00e7\u00e3o \u2013 utilizada atualmente para o monitoramento de pacientes com HIV, para o diagn\u00f3stico bacteriano e viral, entre outras finalidades \u2013 ainda \u00e9 pouco utilizada para pesquisa de anticorpos em flu\u00eddos biol\u00f3gicos.<\/p>\n<p>\u201cConhecemos apenas um outro estudo que emprega uma abordagem baseada em citometria de fluxo em sistema livre de c\u00e9lulas para avaliar a resposta imune humoral, mas n\u00e3o envolve a detec\u00e7\u00e3o dos tr\u00eas anticorpos simultaneamente\u201d, revela Valdameri.<\/p>\n<h2>Da coleta de sangue ao resultado, o processo dura seis horas<\/h2>\n<p>O processo de testagem inicia com a coleta de sangue do paciente. No estudo, foram utilizadas amostras positivas para a covid-19 e negativas (de antes da pandemia) fornecidas pelo Hospital Erasto Gaertner. Ap\u00f3s a obten\u00e7\u00e3o do soro sangu\u00edneo, ocorre a incuba\u00e7\u00e3o do material com esferas de poliestireno (CBA) que imitam uma c\u00e9lula.<\/p>\n<p>\u201cEssas esferas comerciais possuem grupos qu\u00edmicos que permitem a liga\u00e7\u00e3o covalente com prote\u00ednas. Por isso, n\u00f3s purificamos a prote\u00edna do nucleocaps\u00eddeo do Sars-CoV-2 e a ligamos na superf\u00edcie dessas esferas\u201d, indica Vivian.<\/p>\n<p>As esferas s\u00e3o, ent\u00e3o, incubadas com anticorpos comercialmente dispon\u00edveis. Esses anticorpos est\u00e3o ligados com fluor\u00f3foros, mol\u00e9culas que, ap\u00f3s est\u00edmulos de um laser, emitem fluoresc\u00eancia. As an\u00e1lises s\u00e3o feitas \u00e0 medida que as part\u00edculas suspensas na corrente de fluido passam por um feixe de luz do cit\u00f4metro de fluxo.<\/p>\n<figure id=\"attachment_20193\" aria-describedby=\"caption-attachment-20193\" style=\"width: 810px\" class=\"wp-caption aligncenter\"><a href=\"https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Foto-citometro-FACS-Celesta-m-scaled.jpg\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" class=\"wp-image-20193 size-large\" src=\"https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Foto-citometro-FACS-Celesta-m-1024x576.jpg\" alt=\"\" width=\"810\" height=\"456\" srcset=\"https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Foto-citometro-FACS-Celesta-m-1024x576.jpg 1024w, https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Foto-citometro-FACS-Celesta-m-300x169.jpg 300w, https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Foto-citometro-FACS-Celesta-m-768x432.jpg 768w, https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Foto-citometro-FACS-Celesta-m-1536x864.jpg 1536w, https:\/\/ciencia.ufpr.br\/portal\/wp-content\/uploads\/2021\/06\/Foto-citometro-FACS-Celesta-m-2048x1152.jpg 2048w\" sizes=\"(max-width: 810px) 100vw, 810px\" \/><\/a><figcaption id=\"caption-attachment-20193\" class=\"wp-caption-text\">Chamado de cit\u00f4metro, aparelho usado no m\u00e9todo identifica e conta part\u00edculas do soro sangu\u00edneo por meio de pe\u00e7as \u00f3pticas que detectam fluoresc\u00eancia. Foto: Glaucio Valdameri\/Divulga\u00e7\u00e3o<\/figcaption><\/figure>\n<p>Os pesquisadores utilizaram tr\u00eas anticorpos com fluor\u00f3foros distintos, cada um reconhecendo um alvo diferente, para conseguir detectar simultaneamente os tr\u00eas principais tipos de anticorpos anti-Sars-CoV-2: IgG, IgM e IgA. O processo todo dura, em m\u00e9dia, seis horas.<\/p>\n<p>A ferramenta apresentada pelos cientistas fornece, portanto, um modelo para o r\u00e1pido desenvolvimento de avalia\u00e7\u00e3o de anticorpos para o coronav\u00edrus e para outras infec\u00e7\u00f5es emergentes.<\/p>\n<h2>Cientistas pretendem testar outras prote\u00ednas do v\u00edrus<\/h2>\n<p>Os dados apresentados pelos autores demonstram a primeira abordagem baseada na citometria de fluxo para determina\u00e7\u00e3o de respostas IgG, IgM e IgA para covid-19 como uma prova de conceito para estudos futuros. Apesar da inova\u00e7\u00e3o relacionada ao uso de esferas nessa t\u00e9cnica de investiga\u00e7\u00e3o, o dep\u00f3sito de patente n\u00e3o foi realizado.<\/p>\n<p>\u201cGostar\u00edamos que outros pesquisadores, que possuam cit\u00f4metros de fluxo em seus laborat\u00f3rios, aplicassem esse conceito para o diagn\u00f3stico da covid-19 ou de outras doen\u00e7as\u201d, destaca Valdameri.<\/p>\n<p>Os pesquisadores pretendem aprimorar o m\u00e9todo incluindo outras prote\u00ednas do v\u00edrus e aplicar a metodologia a um grupo maior de amostras. \u201cTamb\u00e9m gostar\u00edamos de identificar o perfil de cada um desses anticorpos ao longo do tempo em pacientes infectados com o Sars-CoV-2 e comparar com pacientes vacinados\u201d, revela Vivian.<\/p>\n<p>O laborat\u00f3rio tem apoio do Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient\u00edfico e Tecnol\u00f3gico (CNPq) e da Funda\u00e7\u00e3o Arauc\u00e1ria e financiamento parcial da Coordena\u00e7\u00e3o de Aperfei\u00e7oamento de Pessoal de N\u00edvel Superior (Capes).<\/p>\n<h6>Edi\u00e7\u00e3o: Camille Bropp<\/h6>\n<h6><strong>Artigo cient\u00edfico<br \/>\n<\/strong>ZATTONI et al. <a href=\"https:\/\/chemrxiv.org\/articles\/preprint\/Multiplexed_Flow_Cytometric_Approach_for_Detection_of_Anti-SARS-CoV-2_IgG_IgM_and_IgA_Using_Beads_Covalently_Coupled_to_the_Nucleocapsid_Protein\/14219999\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">Multiplexed flow cytometric approach for detection of anti-SARS-CoV-2IgG, IgMand IgA using beads covalently coupled to thenucleocapsidprotein<\/a>. <em>ChemRxiv<\/em>. 17 mar. 2021.<\/h6>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Um m\u00e9todo descrito por pesquisadores da Universidade Federal do Paran\u00e1 (UFPR), que detecta um anticorpo do v\u00edrus da covid-19 a&#8230;<\/p>\n","protected":false},"author":2805,"featured_media":20184,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":"","fifu_image_url":"","fifu_image_alt":"","_jetpack_memberships_contains_paid_content":false},"categories":[1608,1710,1620,1,1610],"tags":[1976,1139,1972,1138,1688,1958,1973,1974],"acf":[],"yoast_head":"<!-- This site is optimized with the Yoast SEO plugin v23.5 - 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